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 詳述熒光分光光度計測試步驟

詳述熒光分光光度計測試步驟
應如何正確使用熒光分光光度計來進行測試呢？
熒光分光光度計詳細測試步驟
(一)樣品準備
1.液體樣品根據用戶提供的技術指標，檢查濃度范圍是否合適，如果需要稀釋，則要考慮所需溶劑類型和稀釋倍數。
2.固體樣品均勻粉末、片狀或具有光滑平面的塊狀樣品，均可直接測定。
(二)操作步驟
1.開機：接通電源，打開主機開關，點燃(打開)光源后，根據說明書要求啟動計算機。
2.檢測前準備：參照儀器說明書，在20天內至少進行一次激發校準和發射校準，檢測前儀器應預熱。
3.工作條件的選擇：環境溫度應在20℃±5℃;相對濕度不大于70%;電源穩定，無磁場、電場干擾。根據樣品的特性及熒光強度，選擇合適的儀器工作條件(如狹縫、PM增益、響應時間等)。
4.基本測定
(1)熒光激發光譜測定
設置儀器參數，掃描發射波長，找到maxλem，以此為發射波長，記錄發射強度作為激發波長的函數，便得到激發光譜。
(2)熒光發射光譜測定
設置儀器參數，掃描激發波長，找到maxλex，以此為激發波長，記錄發射強度與發射波長間的函數關系，便得到熒光發射光譜。
(3)差譜測定
設置儀器參數，選擇合適的工作方式，測定背景溶液的發射光譜并儲存起來，在一定的工作方式下，掃描樣品溶液的發射波長，得到當時的光度值和儲存的背景值之間的差示值，即差譜。
(4)峰面積積分
選擇適當的工作方式，對樣品溶液進行積分操作，即得到峰面積積分。
(5)熒光強度
選擇合適的測量參數，設置λex、λem，采用定點讀數或掃描方式，即可測得所選波長處的熒光強度。
(6)定量測定
配制一系列已知濃度的標準溶液，在一定的測定條件下，設置λex、λem，按照由稀至濃的次序，測定標準溶液的熒光強度，繪制熒光強度—濃度的工作曲線，不改變儀器參數測定未知溶液的熒光強度，由工作曲線即可求出未知溶液的濃度。
(三)分析結果的表述
1.熒光激發光譜、發射光譜以及其他光譜由儀器控制電腦直接繪出。
2.峰面積積分、熒光強度由儀器控制電腦計算顯示。
3.定量測試：在相同的測定條件下，測定一系列已知濃度的標準溶液的熒光強度，繪制出熒光強度-濃度的工作曲線。濃度未知的溶液的熒光強度測定后，由工作曲線求出該溶液的濃度。 
熒光分光光度計使用注意事項
1.在實驗開始前，應提前打開儀器預熱，并配制好所需的溶液，對于已經配制好的溶液，在不用時放在4℃冰箱中保存，放置時間*過一星期的溶液要重新配制。
2.實驗所用的樣品池是四面透光的石英池，拿取的時候用手指掐住池體的上角部，不能接觸到四個面，清洗樣品池后應用擦鏡紙對其四個面進行輕輕擦拭。
3.在測試樣品時，注意熒光強度范圍的設定不要太高，以免測得的熒光強度*過儀器的測定上限。
4.實驗結束后，要及時的清理臺面，處理廢液，清洗和放置好樣品池，將下次要用的溶液放回冰箱，并且按規定登記實驗記錄，養成良好的實驗習慣。